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BIM試劑盒:大鼠γ干擾素檢測(cè)樣本明確要求您可知道?

更新時(shí)間:2016-11-15   點(diǎn)擊次數(shù):1254次

       

   大鼠γ干擾素檢測(cè)試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠γ干擾素(IFN-γ)水平。用純化的大鼠γ干擾素(IFN-γ)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入γ干擾素(IFN-γ),再與HRP標(biāo)記的γ干擾素(IFN-γ)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的γ干擾素(IFN-γ)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠γ干擾素(IFN-γ)濃度。
代測(cè)樣本要求注意事項(xiàng):
1. 樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因?yàn)榀B氮鈉(NaN3)是辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的抑制劑。
2. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能立即試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 樣本應(yīng)充分離心,不得有溶血及顆粒。
4. 實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
5. 酶標(biāo)包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
6. 建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照都做雙份檢測(cè),取平均值,以減小實(shí)驗(yàn)誤差。
7. 牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計(jì)算結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
8. 本試劑盒定量范圍為75pg/ml-2400pg/ml,超過(guò)此范圍,為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計(jì)算所得,不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果,請(qǐng)用特殊稀釋液稀釋后測(cè)定準(zhǔn)確結(jié)果(75pg/ml-2400pg/ml范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度。
9. 若顯色過(guò)淺,可適當(dāng)延長(zhǎng)底物溫育時(shí)間。
10. 為避免交叉污染,標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照每加一個(gè)就要更換一次吸頭;酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復(fù)使用封板膜。
11. 試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號(hào)的試劑不得混用。
12. 底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。

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